[의학,약학]잎으로부터의 DNA 추출과 전기영동
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작성일 23-09-19 05:12
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③ 파쇄한 즉시 약수저를 이용하여 50mL tube에 약 0.5g을 넣고 즉시 준비된 추출용액(CTAB buffer) 10mL를 넣는다.
⑤ 10mL의 chloroform/Isoamylalchole(24:1) 액을 넣고 뚜껑을 닫고 3~4번 뒤집어 주어 잘 섞이게 한다. 액체 질소는 낮은 온도를 유지할 수 있으면서도 값이 싸고 쉽게 만들 수 있기 때문에 많이 이용된다
하지만 액체질소보존탱크는 원하는 물질을 넣어둔 vial의 뚜껑사이로 액체질소가 스며들어 오염의 가능성이 있으며 매번 액체질소를 충전해야한다는 단점이 있다
또한 액체질소를 사용하다가 손에 튀어 다칠 위험성도 있으며 액체질소탱크 내부에 온도 편차가 있을 수도 있다
2. 식물시료로부터 DNA를 추출하는 과정과 그 원리를 단계별로 說明(설명) 하시오.
① 실험 처음 전 중탕기를 65도에 맞추어 놓는다.
⑨ 3000rpm으로 두고 4도로 유지하여 5분간 원심분리 한다.
④ Vortexing 한 후 65도 중탕기에서 5분동안 중탕하고 꺼내서 흔들어 준뒤 다시 5분동안 중탕한다.
⑩ 뚜껑을 열고 상등액을 따라
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다. Chloroform과 Isoamylalchole은 냄새가 심한 유독성 물질이므로 fumehood내에서 다룬다.
⑥ Swing-bucket centrifuge를 이용하여 3000rpm에서 5분간 원심분리한다.
[의학,약학]잎으로부터의 DNA 추출과 전기영동
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[의학,약학]잎으로부터의 DNA 추출과 전기영동
잎으로부터의 DNA 추출과 전기영동
1. 생체시료의 초저온 장기보존을 위해 deepfreezer를 이용하는 것과 액체질소보존탱크를 이용하는 경우 각 system의 성질과 장단점을 비교說明(설명) 하시오.
deepfreezer는 초저온냉동고로 -80℃에서 sample과 같은 것을 장기간 동안 보관할 수 있지만 비용이 많이 들고 전기가 많이 소요된다는 단점이 있다액체질소보존탱크는 액체질소(-196℃ 상태)를 이용하여 유전자, 조직세포, 골수, 수정란 등을 저장한다. 이때 아래로 가라앉은 식물조직, chloroform, isoamylalchloe은 나중에 폐기통에 폐기한다.
