[생명과학,유전Engineering,분자생물학] 분자생물실험워크북
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작성일 23-03-01 02:31
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Download : 분자생물실험워크북_올림.doc
도움이 되시길 바랍니다. 섞는 방법은 pipette을 up-down하는 방법, 손가락 끝으로 가볍게 툭툭 치는 방법(tapping), 부드럽게 vortex하는 방법 등이 주로 쓰인다.
설명
분자생물 실험 워크북 유전학
A. 제한효소를 이용한 DNA의 절단
분자생물 실험을 위한 워크북으로, 실험에 필요한 모든 방법 및 정보가 총 망라하여 정리되어 있습니다.
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* 효소 원액에는 glycerol이 들어있기 때문에 점도가 높아서 pipetting할 때 tip 끝만 살짝 담구어서 덜어내어야 tip 주위에 효소가 많이 뭍어나오는 것을 막을 수 있다아 또한 효소량이 reaction(반응) 총액의 10%를 넘으면 효소 활성이 glycerol에 의해 억제될 수 있기 때문에 주의해야 한다.
순서
2. 기포가 생기지 않게 주의하면서 섞는다.
10x reaction(반응)완충용액 2 μl
1. 미세 원침관에 micropipette으로 다음과 같이 넣는다. 상품화된 효소는 효소마다 다르지만 대개 10 units/μl 내외의 농도로 공급된다
* 위와 같은 혼합물을 시험관에 넣을 때에는 보통 효소를 가장 마지막에 넣는 것이 좋다.
* 효소는 -20°C에서 50% glycerol이 들어있는 완충액내에서 안정하게 존재하므로 반드시 냉동실에 보관하고 실온에 노출되는 시간을 가능한한 줄인다.
BamH I 제한효소 (10 units/μl) 1 μl
Download : 분자생물실험워크북_올림.doc( 73 )
절단하고자 하는 DNA 5 μg
제한효소 1 unit는 1 μg의 DNA를 최적 온도에서 한 시간에 절단할 수 있는 양이다.
test(실험) 방법
제한효소 처리 reaction(반응)은 절단하려고 하는 DNA, reaction(반응)완충용액, 제한효소로 구성된다 각각의 成分에 대하여 다음과 같은 점들을 고려하여야 할 것이다. 도움이 되시길 바랍니다. 증류수 up to 20 μl
레포트 > 자연과학계열
1) 자를 DNA 내에 제한효소로 잘리는 부위가 몇 개가 되는지 파악한다.
[생명과학,유전Engineering,분자생물학] 분자생물실험워크북
다. 심하게 vortex하지 않는다. 그러나 보통 test(실험) 에서는 계산된 양보다 더 많은 효소를 넣어주기 때문에 그다지 걱정할 필요는 없다.
분자생물 실험을 위한 워크북으로, 실험에 필요한 모든 방법 및 정보가 총 망라하여 정리되어 있습니다. 같은 양의 DNA에 제한효소 절단부위가 무수히 많을 수도 있고 없을 수도 있으며, 이들 경우에 같은 양의 효소작용을 기대할 수 없을 것이다. 총 부피는 대개 20 μl로 한다.
